糖化酶又称淀粉α-1,4-葡萄糖苷酶,此酶作用于淀粉分子的非还原性末端,以葡萄糖为单位,依次作用于淀粉分子中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖。此酶作用于支链淀粉后的产物有葡萄糖和带有α-1,6-糖苷键的寡糖;作用于直链淀粉后的产物几乎全部是葡萄糖。此酶产生菌主要是黑曲霉(左美曲霉、泡盛曲霉)、根霉(雪白根酶、德氏根霉)、拟内孢霉、红曲霉。
将有机溶剂蒸干,于残渣中加定量过量的酸滴定液使溶解,再用碱滴定液回滴剩余的酸;若生物碱易挥发或分解,应在蒸至近干时,先加入酸滴定液"固定"生物碱,再继续加热除去残余的有机溶剂,放冷后完成滴定。
生化试剂盒通过化学反应/酶促反应或物质结构特点测定样本中物质含量或酶活;所用仪器一般为分光光度计和酶标仪,两者的测定原理都是朗伯比耳定律:A=kbc,即当适当波长的一束平行单色光照射固定浓度均匀溶液时,其吸光度与光通过的液层厚度成正比。土壤、水质、动植物组织、血清、细胞细菌、食品等样本均可以进行测定。
RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase完全失活。为了获得高质量的真核细胞mRNA,必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。
苏木素-伊红(hematoxylin/eosin)染色法是一种用普通光学显微镜观察凋亡细胞形态学特征的简便方法。细胞凋亡时主要的形态学变化为细胞体积变小,胞质浓缩,染色质高度凝集、边缘化,呈新月状,随后染色质裂解成大小不等的块状,核膜裂解,细胞以类似胞吐的方式形成凋亡小体。苏木素容易被氧化,其氧化产物苏木红是真正的染料,苏木红与铝结合形成一种带正电荷的蓝色色精,呈碱性。带负电荷的脱氧核糖核酸根和带正电荷的蓝色色精进行极性吸附而完成细胞核的染色。伊红可分为几种,如伊红Y和伊红B等。伊红Y是一种酸性红色胞质性染料,对细胞质、肌纤维及胶原纤维具有着色性,呈粉红色。细胞经HE染色后,细胞核呈蓝紫色,细胞质呈粉红色,根据凋亡细胞的形态学特征可观察细胞凋亡的情况。